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成都干细胞储存告诉你收到常温细胞后如何处理?

2019-06-26

  成都干细胞储存告诉你收到常温细胞后如何处理?

  1、首先,观察细胞培养瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象。

  2、用75%酒精擦拭细胞培养瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题,部分贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落;先不要打开培养瓶盖,将细胞置于细胞培养箱内静置培养2-4H,以便稳定细胞状态。

  3、仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如贴壁特性(贴壁/悬浮)、细胞形态、所用基础培养基、血清比列、所需细胞因子、传代比列、换液频率等。

  4、静置完成后,取出细胞培养瓶、镜检、拍照,记录细胞状态(所拍照片将作为后续服务依据),建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。

  5、贴壁细胞;若细胞生长密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,移除细胞培养瓶内培养基,预留5ml左右继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作,瓶盖可稍微拧松。

  6、悬浮细胞,将细胞培养瓶内液体全部转移至50ml无菌离心管内,1200rpm离心5min,离心后上清培养基可收集备用,管底细胞沉淀加入5ml培养基吹打、重悬。镜检时,若细胞密度超过80%可将细胞悬液分至2个培养瓶内培养,补加培养基5ml;若细胞密度未超过80%将细胞悬液移至原瓶继续培养,直至细胞密度达80%左右再进行传代操作。

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